پایان نامه بررسی مولکولی کرم بالغ و ایزوله شتری اکینوکوکوس گرانولوزوس

بررسی مولکولی کرم بالغ و ایزوله شتری اکینوکوکوس گرانولوزوس در منطقه اصفهان با روش HRM

دسته بندی: علوم پزشکی » پیراپزشکی

تعداد مشاهده: 59 مشاهده

فرمت فایل دانلودی:.doc

فرمت فایل اصلی: doc

تعداد صفحات: 162

حجم فایل:7,519 کیلوبایت

  پرداخت و دانلود  قیمت: 15,000 تومان
پس از پرداخت، لینک دانلود فایل برای شما نشان داده می شود.
0 0 گزارش
  • خلاصه فارسی

    سابقه و هدف : هیداتیدوز یکی از مهمترین بیماریهای زئونوز در سطح جهان است. علی­رغم اینکه تاکنون سویه­های مختلف اکینوکوکوس گرانولوزوس بر اساس خصوصیات مرفومتریک، بیوشیمیائی، مولکولی و ژنوتایپینگ شناسائی شده ولی اطلاعات کمی درمورد خصوصیات ژنوتایپ­های انگل در منطقه اصفهان وجود دارد. ازاین رو مطالعه حاضر به منظور تعیین خصوصیات مرفومتریک کرم بالغ و مرحله متاسستودی آن و تعیین ژنوتایپ­های انگل در ایزوله­های شتر و سگ جمع آوری شده درمنطقه اصفهان به عنوان میزبان واسط و نهائی انگل با روش­هایPCR-RFLP ، تعیین توالی و HRM و با استفاده از ژن­های میتوکندریائی CO1 و ND1 صورت گرفته است.

    مواد و روش­ها: مطالعه حاضر به منظورسنجش تنوع ژنتیکی اکینوکوکوس گرانولوزوس با طراحی مقطعی طی سال­های 95-1394صورت پذیرفت. در مجموع 8 نمونه کبد و 43 نمونه ریه آلوده به کیست هیداتید شترجمع آوری شده از کشتارگاه­­های صنعتی زرین شهر و نجف آباد و200 کرم بالغ جمع آوری شده از سگ­های ولگرد مناطق مختلف جغرافیایی اصفهان مورد شناسائی مرفومتریک و مولکولی با روش­های PCR-RFLP، تعیین توالی و HRM و با استفاده از ژن­های میتوکندریائی CO1 و ND1 صورت گرفت. ازآنزیم­های محدودالاثرMsp1 وRsa1 به ترتیب برای تعیین الگوی هضم آنزیمی ژن­های CO1 و ND1 کلیه ایزوله­ها استفاده شد.20 ایزوله (15 ایزوله کیست هیداتید شتر و 5 ایزوله کرم بالغ) تعیین توالی گردید. به منظور تعیین ژنوتیپ، کلیه ایزوله­ها با استفاده از دمای ذوب DNA با محدوده50/77 تا 23/79 درجه سانتی­گراد برای ژن CO1 و80/77 تا 80/78 درجه سانتی­گراد برای ژن ND1 مورد آنالیز HRM قرار گرفت. به منظور تعیین میزان مشابهت ژنتیکی بین سکانس­ها و همچنین در مقایسه با موارد ثبت شده در بانک ژن، توالی­ها بااستفاده از نرم افزار Clastalw2 مورد آنالیز دوبدو قرار گرفت. دراین بررسی12 شاخص مرفومتریک کرم بالغ و 8 شاخص مرفومتریک قلاب­های پروتواسکولکس محاسبه و اندازه گیری شد. از آزمون آماری ANOA برای تعیین اختلافات مرفومتریک استفاده گردید.

    نتایج: آنالیز مرفومتریک طول و عرض کرم بالغ را به ترتیب 25/1147±3073 و 41/141±80/414 میکرون ، نسبت طول کرم به بند بارو را 09/2، طول و عرض قلاب­های پروتواسکولکس را به ترتیب79 /1±32/27 و 05/1±17/9 میکرون و تعداد قلاب را 2±61/35 عدد نشان داد. آنالیز PCR-RFLP قطعات bp310 و bp 138 را برای ژن CO1 و قطعات bp381 و bp 223 و bp 221 را برای ژن ND1 نشان داد که گویای ژنوتیپ G1 در منطقه می­باشد. هر دو روش مولكولي آنالیز توالی­ها و HRM ژن­های CO1 و ND1 وجود ژنوتیپ­ هایG1 ، G3 و G6 را در شتر و سگ مورد تائید قرار داد. میزان مشابهت ژنتیکی دو ژنND1 و CO1 در بین ایزوله­های شتر و همچنین در مقایسه با موارد ثبت شده در بانک ژن 25/30 درصد تا 100 درصد و برای ایزوله­های سگ 47/27 درصد تا 100 درصد متغیر بود.

    نتیجه گیری:  مطالعه حاضر نشان داد ژنوتایپ­هایG1 ، G3 و G6 در چرخه اکینوکوکوس گرانولوزوس بین سگ و شتر مشاهده می­شود. ژن­های میتوکندریائی ND1 و CO1 مارکرهای مولکولی مناسبی برای  تعیین ژنوتایپ و تغییرات ژنتیکی اکینوکوکوس گرانولوزوس می­باشد. سویه غالب E.granulosus در منطقه اصفهان همانند سایر نقاط کشور ژنوتیپ G1 می­باشد. همچنین نشان داده شد، روش­های مولکولی تعیین توالی و روش سریع و قابل اعتماد HRM نسبت به روش PCR-RFLP  براي تعيين ژنوتایپ ارجحیت دارد.



    برچسب ها: اکینوکوکوس گرانولوزوس شتر PCR RFLP HRM تعیین توالی ژنوتایپ ایران
  • word
  

به ما اعتماد کنید

تمامي كالاها و خدمات اين فروشگاه، حسب مورد داراي مجوزهاي لازم از مراجع مربوطه مي‌باشند و فعاليت‌هاي اين سايت تابع قوانين و مقررات جمهوري اسلامي ايران است.
این سایت در ستاد سازماندهی ثبت شده است.

درباره ما

فروش اینترنتی فایلهای قابل دانلود، پروژه، مقاله، پایان نامه، گزارش کار و....
در صورتی که نیاز به راهنمایی دارید، صفحه راهنمای سایت را مطالعه فرمایید.
ایمیل: info [at] stufile.ir
پیامک سایت: 500028356615
شرکت به پرداخت ملت درگاه پرداخت پارسیان

تمام حقوق سایت StuFile.ir محفوظ می باشد و هرگونه کپی برداری پیگرد قانونی دارد. طراحی سایت